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千亿国际菌种保存和微生物常识

文章来源:未知 更新时间:2017-05-03 13:36

  

  千亿国际娱乐营养:从外部摄取其生命活动所必需的能量和物质,满足生长和繁殖需要的一种生理过程。是生命活动的物质基础,是生命活动的起点。

  营养物:具有营养功能的物质。也包括光能。提供生物的结构物质、能量、代谢调节物质和良好的生理。

  培养基:人工配制、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的混合养料。要求:应具备6大营养要素;物质比例合适;必须灭菌。

  二、化学的方法:用化学试剂或杀灭微生物。主要细菌代谢机能。如重金属离子,磺胺类药物及抗生素等。

  2、热空气灭菌利用高温干燥空气(160-170C)加热灭菌1-2h,适用于玻璃器皿和培养皿等。原理加热使蛋白质变性,与水的含量有关,当和细胞含水量越大,凝固越快。

  (2)湿热法 :原理:因为湿热中菌体吸水,蛋白质容易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低;湿热的蒸气有潜热存在。所以效果比同温度下干热好。

  常压蒸汽灭菌:对于不宜用高压蒸汽灭菌的培养基如明胶培养基、牛乳培养基,含糖培养基等可采用此法。彻底灭菌则采用间歇灭菌方法。

  超高温杀菌:135-150°C和2-8s对牛乳和其它液态食品。优点 :保持食品价值和营养成分。

  原理:紫外线nm,具有杀菌作用,以265-266杀菌力强。此段波长易被细胞中核酸吸收;可产生臭氧和过氧化氢。杀菌效力与强度和时间的乘积成正比。

  1、倒平板: 牛肉膏蛋白胨培养基,高氏I号培养基,查氏培养基冷却至55-60℃时,混匀后倒平板,牛肉膏蛋白胨培养基倒4皿,高氏I号培养基和查氏培养基各倒3皿。

  2、制备污水稀释液:10g土样,加入90ml无菌水中,在三角瓶中振摇20min。取0.5ml 加入盛有4.5ml无菌水的试管中,制成不同稀释度。

  3、涂布:将上述每种培养基平板底面标记稀释度,然后用无菌吸管从最后三种稀释度,10-5和10-6的试管中吸取0.1ml对号放入平板上,用玻棒涂布。

  4、培养:高氏I号和查氏倒置培养于28℃培养箱中培养3-5days,牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在37℃培养1-2days。

  保藏的菌种通过斜面、穿刺或疱肉培养基(用于厌氧细菌)培养好后,置4C冰箱中存放,定期进行传代培养、再存放。

  L-干燥不需要低温预冻样品,只是使样品维持在10-20C范围内进行线、斜面保藏法

  将菌种转接在适宜固体斜面培养基上,待其充分生长后,用牛皮纸将棉塞部分包扎好(棉塞换成胶塞效果更好),置4C冰箱中包藏。

  保藏时间依微生物的种类而定。霉菌、放线个月移种一次,酵母菌间隔两个月,普通细菌一个月,假单胞菌两周传代一次。

  此法实用且效果较好。霉菌、放线菌、芽孢菌可保藏两年以上,酵母菌可保藏1-2年,普通细菌也可保藏1年左右。

  取河砂若干加入盐酸10% ,加热煮沸30min除去有机机质。倒去盐酸溶液,用自来水冲洗至中性,最后一次用蒸镏水冲洗,烘干后用40目筛子过筛,弃去粗颗粒,备用。

  取非耕作层不含腐殖质的痩黄土或红土,加自来水浸泡洗涤数次,直至中性。烘干后碾碎,用100目筛子过筛,粗颗粒部分丢掉。

  处理妥当的河砂与土壤按3:1的比例掺合(或根据需要而用其他比例,甚至可全部作砂或土)均匀后,装入10x100mm的小试管或安瓿管中,每管分装1g左右,塞上棉塞,进行灭菌(通常采用间歇灭菌2--3次),最后烘干。

  每10支砂土管随机抽1支,将砂土倒入肉汤培养基中,30℃培养40h,若发现有微生物生长,所有砂土管则需重新灭菌,再作无菌试验,直至证明无菌后方可使用。

  取生长健壮的新鲜斜面菌种,加入2-3ml无菌水(每18x180mm 的试管斜面菌种),用接种环轻轻将菌苔洗下,制成菌悬液。

  将装有菌悬液的砂土管放入干燥器内,干燥器底部盛有干燥剂。用真空泵抽干水分后火焰封口(也可用橡皮塞或棉塞塞住试管口)。

  置4℃冰箱或室温干燥处,每隔一定的时间进行检测。此法多用于产芽孢的细菌、产生孢子的霉菌和放线菌。在抗生素工业生产中应用广泛、效果较好,可保存几年时间,但对营养细胞效果不佳。

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